DEAE磁珠 Magrose DEAE

保存：2~8℃保存，有效期1年。

产品说明：

     Magrose DEAE是一种弱阴离子交换磁珠，具有快速的磁响应性、丰富的离子交换能力和极高的蛋白结合能力。离子交换配基为二乙氨乙基（diethylaminoethyl，DEAE），该配基在 pH3-12的工作范围内仍然能够保持稳定的高蛋白结合能力。

与传统柱层析纯化方式相比，Magrose DEAE 磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理（如：反复繁琐的离心，费时费力的过滤操作），此外，无需控制流速及柱压，不需要昂贵的层析设备。对于熟练的操作者来说，在很短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取，且能轻松实现多个样品的平行处理，实现高通量的蛋白纯化。

产品信息：

注：1. 蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值；

2. 1 mL 磁珠悬液中含有 100 µL 磁珠。

产品优势

1. 磁响应速度快，减少操作时间

2. 磁珠具有良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性

3. 配基具有良好的物理化学稳定性，提高了实验结果的可靠性及可重复性

操作流程（以纯化含 BSA 蛋白样品为例）

1. 磁珠预处理（平衡）：将Magrose DEAE 磁珠漩涡振荡 30 s，使磁珠充分重悬；取一定量的 10%

（v/v）磁珠悬液置于 50 mL 离心管中。对磁珠悬液进行磁性分离，弃上清液，加入 20 mL 平衡

缓冲液洗涤磁珠 3 次，每次垂直混合2 min。

注：为了获得目标蛋白的最大回收率，实验者需要加入过量的Magrose DEAE磁珠，一般大于蛋白结合量的20%即可。对于含较低丰度目标蛋白的样品中，磁珠对目标蛋白的回收率会有所降低，因此需要继续增大磁珠的用量；

2. 蛋白吸附：将预处理的磁珠加入含 BSA 蛋白的样品溶液中，漩涡振荡 30 s，置于垂直混合仪混匀30~60 min，使样品和磁珠充分接触并吸附，然后进行磁性分离，移弃上清液。

注：为了更有效率的吸附结合物质，平衡缓冲液最好含有较低的离子强度，选择的 pH 值应该至少与目标蛋白的等电点相差一个 pH 单位，选定的盐缓冲液 pH 波动在 0.5 pH 以内。目标蛋白与磁珠的吸附时间与蛋白的本身属性有关。

3. 磁珠洗涤：加入 20 mL 的平衡缓冲液，漩涡振荡重悬磁珠 30 s 后进行磁性分离，移弃上清液；该操作重复 3 次。

4. 蛋白洗脱：在上述完成磁珠洗涤的离心管中加入适量的洗脱液进行蛋白洗脱。用移液器吹打或者涡旋振荡下迅速重悬，然后将离心管置于垂直混合仪混匀 10~15 min 后进行磁性分离，收集上清液至新的离心管中。洗脱方式主要有高盐浓度洗脱（含1-2 M的NaCl的平衡缓冲液）和低pH洗脱（选择低于目标蛋白等电点的pH范围即可）两种。

5. 磁珠再生：一般采用2 M NaCl溶液洗涤3~5 次，然后用平衡缓冲液进行再平衡处理。磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上，为了保证磁珠的使用效率，建议进行在位清洗（CIP）。

6. 在位清洗（CIP）：依次采用1.0 M NaOH、70%乙醇或 30%异丙醇、纯化水洗涤磁珠2次；最后加入20%乙醇重悬磁珠，置于2~8℃保存。

注意事项

1. 本产品不宜冷冻、干燥或离心操作。冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。

2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。

3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠2~3 次，以去除保存液中乙醇。

4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。

5. 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱，客户需自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件，以保证蛋白纯化量和纯度。

6. 本产品仅供研究使用。